|
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。胎牛血清是血清中的一种,是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清。胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。
8 O; t- K* `9 H& x6 i% s5 u' q1 W+ ]2 K( ?% i# M- G' r) K
胎牛血清的主要作用
' y8 F8 \0 r2 V! q N% G: m2 V( O+ y9 a
1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2 Y6 w' a/ m3 ?( k" x
6 c/ w8 @2 k9 Z- l, d3 n3 e2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
0 b" D2 r( j6 l+ o3 W0 p k8 X( ~, P! z' l+ H
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。! m" V2 _9 |) [ k2 P
! y3 N+ I4 q+ A; p6 T( g4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
! f# v* O' g- ^' s: E; ]
& E* I o& ? P3 U7 v4 S! i5.起酸碱度缓冲液作用。, t# A1 O2 ]! B4 h
3 b' j( Q9 e$ Z6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。6 A, O+ N/ o3 w
9 v9 b' ^$ Z k/ O4 o1 }
胎牛血清的选择! [& t7 k1 C. E# D+ w, O
W$ ^# n: F, _. q7 N: z1.颜色; E9 T3 p# d/ C4 i
0 x1 j+ a0 r0 k根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高度对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程中严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。# q' t- K2 A2 Y S5 y$ c
6 X# r, o$ ~$ m* O* `
进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。
) i3 I" A) j i+ E) }# h! H! [( D( }, f5 Z
总的来说,国产的血清总呈现出蜡黄,进口的血清质量最好的呈现出淡黄、微红色。当然热灭活血清或保存不当的血清,由于红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。
4 u1 F) s: T# u. f" c" g" s$ f! k" ^
2.沉淀5 b. s6 M0 ?- r) E
! t+ e. R9 L- {& x2 x很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。
& Z% Z! v( R& A% y+ Y, `5 @& c9 c% K- @) d* ]
血清中的沉淀是由纤维蛋白凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。/ ~4 x9 C; D; N! [
6 g9 i7 r' l* i) @: W3 w国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到生产经过多次冻融,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。
* b. e0 n. X% ?, m( v2 {, G, q/ E
* E% Q" y# V& s$ k. G进口的胎牛血清过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中大量纤维蛋白会析出形成沉淀,当然,进口的新生牛血清,一般牛年龄在2周左右,血清中的各种大量纤维蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。
" T# T6 \$ B3 W3 _% [
) }1 Q1 I/ d+ x) Z. W+ Y( g" }当然,购买回来的血清都是冷冻状态,使用时需要融化,融化过程最好在温度较低的状态下慢慢融化,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
6 t: w, `4 g O9 A8 f# ]
* k' Z7 ~/ Q* y ~3 r: x3.澄清度0 R) r; m$ Z3 S, t, W0 N+ S1 @8 e" G
% X% u, z) [& \. B2 S
进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,标签为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。
* r; o1 l+ e$ V+ z% _7 A
% @/ k. K# O/ s5 i |
|