建立抗SARS病毒疫苗之我见

严重急性呼吸道综合症（SARS）从去年11月在中国广东省发现至今，短短数月暴发，目前该传染病已波及亚洲，欧洲，北美几十个国家，近万人确症患病，数百人已经死亡。四月底，加拿大和美国科学家首先鉴定出SARS病原为冠状病毒的一个变种，29751个碱基的单链RNA囊膜病毒。经基因全序列测定，发现从种系发生学角度看，与已经存在的三组冠状病毒较少同源性，其来源目前尚不清楚。全序列测定，使PCR介导的临床快速诊断和免疫测试在一周内建立，从而能及时准确地确症阳性病患者。<br>然而，建立抗SARS病毒疫苗，必须首先理解其复制机制。<br>SARS病毒基因图谱含5个开放阅读框（open reading frame, ORF）：5`- 解旋酶（rep）- 钉锤蛋白（spike, S）- 囊膜蛋白 （envelop, E）- 膜蛋白（membrane, M）- 核衣壳 （necleocapsid, N）-3`, 两端存在一些短的未翻译区。病毒一但进入寄主细胞，病毒基因组首先翻译成前体蛋白，经病毒编码的蛋白酶切割，成为几个非结构性蛋白质：包括依赖RNA的RNA聚合酶（Rep）和ATP酶解旋酶。这些蛋白质负责进一步复制病毒基因组。病毒采用巢式转录合成病毒自身蛋白，即，亚基因转录是不连续的。位于5`端的转录调节序列（transcription regulating sequences, TSRs）控制这一过程。主要的膜蛋白（S和M）被翻译出来后，进入内质网-高尔基中间体（ERGIC）中，在此期间，全长的正义RNA链结合核衣壳蛋白（N），再和内质网中的M蛋白偶连，也进入内质网。装配完全的病毒颗粒通过高尔基体分泌出细胞外。病毒再次侵染健康细胞，它的S蛋白用于吸附细胞表面。<br>和所有正链RNA病毒一样，SARS病毒复制需要经过负链中间体，再转录成正链。在此过程中，依赖RNA的RNA聚合酶（Rep）发挥关键作用。由于Rep的序列已解读，胡康洪博士认为，应立即尝试用RNA干扰技术（RNA interference）下调Rep的mRNA表达，试图阻断Rep合成，中断病毒复制循环。利用这种技术，迅速合成各种小片段siRNA, 首先在SARS病毒可以稳定复制的非洲绿猴肾细胞培养中测试效果，一但找到合适的siRNA, 可用化学修饰稳定RNA分子，并加入Liposome一类的载体包装RNA, 对患者直接进行血液注射。<br>